Seroprevalence, cost per donation and reduction in blood supply due to positive and indeterminate results for infectious markers in a blood bank in Lima, Peru

ABSTRACT Introduction: Safety in Transfusion Medicine is subject to regulations and government legislation within a total quality framework. The aim of this study was to evaluate the impact of seroprevalence and indeterminate results on lost units and cost per donation. Methods: A prospective cross-sectional study was performed in the Blood Bank and Transfusion Therapy Department of the Hospital Central de la Policia Nacional del Perú in Lima, Peru. All completed donations (replacement/voluntary) without complications were included in this study. Every donation met the institutional requirements and quality criteria of Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre (PRONAHEBAS). Data analysis was achieved using the Statistical Package for the Social Sciences. Results: A total of 7723 donations were evaluated during 2014 and 2015 with 493 being seropositive (overall prevalence 5.25%) and 502 having indeterminate results (overall prevalence 5.35%). Thus total loss was 995 units, 437.8 L of blood and 49,750 US dollars. The most common seropositive infectious markers were the core antibody of hepatitis B virus (2.82%) and syphilis (1.02%), and the most common indeterminate results were Chagas disease (1.27%) and the core antibody of hepatitis B virus (1.26%). There was no significant change in the prevalence of seropositivity (p-value = 0.243) or indeterminate results (p-value = 0.227) over the two-year period of the study. A statistical correlation was found between the cost per lost donation and the most prevalent markers (rho = 0.848; p-value = <0.001). Conclusion: Seroprevalence was lower than the regional mean, but the prevalence of indeterminate results was elevated causing a great impact on blood supply and economic losses to this institution.

Virus emergentes de importancia en medicina transfusional: paradigmas, hitos, aprendizajes / Emergent virus with importance in transfusional medicine: paradigms, milestones, learnings

Las infecciones emergentes juegan un papel importantísimo en medicina transfusional. La experiencia con HIV puso en evidencia la necesidad de actuar rápidamente. La lentitud en la respuesta de los Bancos de Sangre y la falta de un liderazgo en la adopción de medidas preventivas dieron lugar a una transmisión importante por vía transfusional. En cuanto a las hepatitis postransfusionales NANB, aprendimos las lecciones acerca de las pruebas subrogantes. Sin embargo, la respuesta para prevenir la transmisión de HCV fue lenta porque la comunidad científica estaba focalizada en la transmisión de HIV. En el caso del XMRV, la presión ejercida por la comunidad fue muy importante. Se formaron grupos multidisciplinarios de expertos que realizaron gran cantidad de estudios y la respuesta ocurrió rápidamente, aunque al poco tiempo se demostró que este patógeno no era relevante para la Medicina Transfusional. Con respecto al WNV, la familiaridad con los modelos desarrollados por el CDC para estimar los riesgos y las lecciones aprendidas por las experiencias con HIV y HCV facilitaron una respuesta rápida y se implementaron medidas rápidamente para minimizar el riesgo de transmisión por vía transfusional. Se abrió un nuevo paradigma: la importancia de considerar los riesgos de transfusión que pueden derivar de agentes que causan viremias breves, usualmente asintomáticas, pero con el potencial de generar brotes estacionales de alta incidencia. La respuesta a la amenaza con WNV fue rápida, apropiada y exitosa. Las nuevas herramientas de biología molecular han permitido el aislamiento de numerosos gérmenes emergentes y lo seguirán haciendo en el futuro. Estar alertas ante nuevos patógenos de potencial importancia es nuestra responsabilidad.

Emerging infections play an extremely important role in transfusion medicine. Experience with HIV highlighted the necessity to act quickly. The slow Blood Banks response and the lack of leadership in the adoption of preventive measures resulted in a significant transfusional transmission. Regarding the post-transfusion NANB hepatitis, we have learned the lessons about the surrogate tests. However, the response to prevent HCV transmission was slow given that the scientific community was focused on HIV transmission. In the case of XMRV, pressure from the community was extremely important. Multidisciplinary groups of experts who conducted many studies were formed and the answer came quickly, but soon it was proved that this pathogen was not relevant to Transfusion Medicine. With respect to WNV, familiarity with the models developed by the CDC to estimate the risks and lessons learned from experiences with HIV and HCV facilitated a quick response, and measures were quickly implemented to minimize the risk of transmission by transfusion. A new paradigm came up: the importance of con­sidering the risks of transfusion that may result from agents that cause brief, usually asymptomatic viremia, but with the potential to generate high incidence seasonal outbreaks of viralloads. The response to the threat with WNV was rapid, appropriate and successful. The new tools of molecular biology have allowed the isolation of many emerging germs and will continue to do so in the future. Being alert to new pathogens of potential importance is our responsibility.

Pautas para el diagnóstico, notificación y asesoramiento de la infección por virus linfotrópico T humano tipo 1 y 2 (HTLV-1/2) en Argentina / Guidelines for the diagnosis, notification and advising for human T-cell lymphotropic virus type 1 and 2 infection in Argentina

El virus linfotrópico T-humano tipo 1 (HTLV-1), primer oncoretrovirus humano descubierto, es el agente etiológico de la Leucemia de Células T del Adulto (ATL) y de la Mielopatía Asociada al HTLV-1 o Paraparesia Espástica Tropical (HAM/TSP). El HTLV-2, no tiene un rol etiológico definido, si bien se lo ha asociado con síndromes neurológicos similares a la HAM/TSP. En Argentina, la detección de anticuerpos para HTLV-1/2 en donantes de sangre es obligatoria desde noviembre de 2005 (resolución 865/2006 del Ministerio de Salud y Ambiente), si bien fue recomendada por la Asociación Argentina de Hemoterapia e Inmunohematología desde el año 1997. Uno de los problemas que se presenta en nuestro país, es la notificación de resultados de esta infección y las dificultades que debe afrontar el médico para brindar la información correcta. En este trabajo se presenta una visión general sobre estos retrovirus, y en especial se brinda información sobre diagnóstico, patogenia y las conductas a seguir por los profesionales de la salud ante la necesi­dad de informar resultados basados únicamente en pruebas de tamizaje o con serología positiva para HTLV­1/2. Para el mismo, nos hemos basado en las recomendaciones y lineamientos elaborados por los Centros de Control de Enfermedades (CDC) y Prevención y el grupo de trabajo del Servicio de Salud Pública de Estados Unidos (USPHS Working Group) dirigidas a las personas infectadas y a trabajadores de la salud e instituciones oficiales de salud pública.

Human T-celllymphotropic virus type 1 (HTLV-1), the first human oncoretrovirus discovered, is the ethiologic agent of Adult T-cell Leukimia (ATL) and HTLV-1 Associated Mielopathy o Tropical Spastic Paraparesis (HAM/TSP). HTLV-2, has not a defined ethiopathology, although it has been associated to neurologic syndroms similar to HAM/TSP Screening for HTLV-1/2 antibodies in blood donors is mandatory since 2005 (Resolution 865/2006 of the Ministry of Health, Argentina) although it has been recomended by the Hemotherapy and Immunehemathology Association since 1997. One of the problems in our country is the notification of the results and the difficulties encountered by the medical doctor in order to provide the appropriate information. In this study, we provide an outlook of these retroviruses, and especially we give information about diagnosis, pathogenesis and guidelines for health professionals when HTLV-1/2 positive serology needs to be notified. We based these recommendations on the guidelines elaborated by the Centers for Disease Control and Prevention and the working group of the US Public Health Service (USPHS Working Group) directed to infected people and to health workers and official institutions of public health.

Tamizaje serológico de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en bancos de sangre / Serological screening of antibodies to Trypanosoma cruzi in blood banks

Blood transfusion is the second most common way of Chagas' disease infection in affected countries. The WHO recommends the use of at least two tests in the serological screening of blood donations. The conventional tests, enzyme-immunoassay (EIA) and indirect hemagglutination (IHA) are not sufficiently sensitive and specific. The aim of this work was to study the prevalence of anti-Trypanosoma cruzi in our blood donor population and to compare the relative sensitivity and specificity of different tests. We evaluated 103 752 consecutive voluntary blood donors with IHA (Polychaco) and EIA (Biomerieux and Abbott). Repeatedly reactive samples were analysed using a third method. The seroprevalence was 2.26% and 1.34% were confirmed positive. All the EIAs used in our studies were more sensitive than the IHAs with different specificities. The recombinant EIA evidenced a greater relative specificity than the conventional one and a very good performance in sensitivity was observed. In blood banks screening it is very important to use tests with reliable and reproducible results instead of an association of tests that provide discordant results of difficult interpretation. In conclusion, it would be appropriate to consider the possibility of employing only one test, such as an improved EIA, which shows greater sensitivity and specificity

La vía transfusional es la segunda ruta de infección más común de la enfermedad de Chagas en regiones endémicas. La OMS recomienda el uso de al menos dos ensayos en el tamizaje serológico en bancos de sangre. Las pruebas convencionales, enzimoinmunoensayo (EIA) y hemaglutinación indirecta (HAI), no son suficientemente sensibles y específicas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la prevalencia de anticuerpos antiTrypanosoma cruzi en nuestra población de donantes de sangre y comparar la sensibilidad y la especificidad relativa de diferentes ensayos. Evaluamos 103 752 donantes voluntarios consecutivos con HAI (Polychaco) y EIA (Biomerieux y Abbott) y la eficacia de un EIA recombinante y otro método de HAI. La seroprevalencia fue 2.26% y 1.34% se confirmaron positivos. Todos los EIA utilizados fueron más sensibles que los HAI con diferente especificidad. De los EIA, el recombinante presentó la mayor especificidad relativa y se observó muy buen resultado en cuanto a la sensibilidad. Lo más importante en el tamizaje serológico es que se utilicen pruebas cuyos resultados sean reproducibles y confiables, y no la asociación de ensayos que proporcionen resultados discordantes de difícil interpretación. En conclusión, para el tamizaje en bancos de sangre, se podría comenzar a pensar en la posibilidad de la utilización, como única prueba, de un método de EIA mejorado que presente mayor sensibilidad y especificidad

Anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en donantes de sangre / Serological screening of antibodies to Trypanosoma cruzi

La vía transfusional es la segunda ruta más común de infección de la enfermedad de Chagas en regiones endémicas. Para el tamizaje de donantes de sangre, la OMS recomienda el uso de al menos dos ensayos. Las pruebas convencionales, Enzimoinmunoensayo (ELISA) y hemo-aglutinación indirecta (HAI), no son suficientemente sensibles y específicas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la prevalencia de anti-T.cruzi en nuestra población de donantes de sangre, y comparar las sensibilidades y especificidades relativas de diferentes ensayos. Evaluamos 12479 donantes consecutivos con HAI y ELISA y de ellos, seleccionamos un panel de 138 muestras para estudiar sensibilidad y 784 para especificidad. La seroprevalencia fue 1,89 por ciento (ES: 0,122; IC: 1,65-2,14; p<0,05) y 1,10 por ciento (ES: 0,094; IC: 0,91-1,29; p<0,05) se confirmaron positivos. De los ELISAs, el recombinante presentó la mayor especificidad relativa y se observó una muy buena performance en cuanto a la sensibilidad, con valores de densidad óptica más elevados. Este ensayo es útil para tamizaje o como un tercer método para confirmar resultados discordantes en donantes de sangre.

Virus de West Nile. Nuevo virus emergente en medicina transfusional / West Nile Virus. A new emergent virus in transfusional medicine

West Nile virus is a member of the Flaviviridae family. It was first isolated in Uganda and is indigenous to Africa, Asia, Australia and southern Europe. In recent years, local epidemics have been reported in Romania, Russia and Israel. In 1999 the virus presented a rapid emergence in North America and until November 2002 it has caused over 4,100 symptomatic infections in humans, of whom more than 240 have died. The life cycle of the virus includes mosquitoes as vectors with birds as amplifying viremic vertebrate hosts. Human, horses and other animals serve as dead-end hosts. Most infections are mild, with symptoms primarily being fever, headache, and myalgias. People older than 50 years are at highest risk of severe disease, which include encephalomyelitis. In 2002, 5 new modes of transmission were recognized: blood transfusion, organ transplantation, breast-feeding, transplacental transmission and occupational exposure in laboratory workers. Regarding blood transfusion, during the 2002 West Nile virus epidemic in the United States, 23 patients were confirmed to have acquired West Nile virus through transfused red cells, platelets or fresh-frozen plasma. Currently, there is no specific drug treatment or vaccine against the infection, and avoiding mosquito bites is the best way to protect against the disease.

Riesgo de transmision de infecciones por via transfusional / Risk of transfusional-transmitted infections

Although each donated unit of blood is tested for evidence of infection by specific agents, there are at least four potential reasons why transmission of these agents may still occur: a) the donor has negative laboratory test results during the early stages of infection, known as the window period, b) the existence of a chronic carrier state in which a clinically asymptomatic donor will persistently test negative on a screening assay, c) donors harbouring a mutant or atypical variant and d) laboratory errors when performing the screening tests. Measures to assure the safety of blood and blood components include use of voluntary donors, donor selection and questioning, laboratory testing for serological markers of infections, maintenance of registries of disqualified donors and, more recently, the introduction of direct testing for viral nucleic acids. All these measures must be accompanied by rigorous quality control systems. The potential risk of transfusion-transmitted infectious diseases can be estimated by reviewing the records of blood donations, the screening procedures and determining the prevalence of the serologic markers of infectious diseases. Accurate estimates of the risk of transfusion-transmitted infections are needed in order to monitor the safety of the blood supply and evaluate the yield and cost effectiveness of alternatives to allogeneic transfusion. Genomic screening for infectious agents, especially viruses, became possible with the development of various nucleic acid amplification techniques. They combine the advantages of direct detection of the organism with a sensitivity several orders of magnitude higher than that of traditional methods (AU)#S

Prevalencia de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en donantes de sangre / Prevalence of anti-Trypanosoma cruzi antibodies in blood donors

La transmisión de la enfermedad de Chagas por vía transfusional es la segunda causa en importancia de infección en áreas endémicas. Existen discrepancias en los resultados obtenidos con los equipos disponibles para el estudio de la presencia de marcadores serológicos anti-Trypanosoma cruzi. El objetivo del presente trabajo fue determinar la seroprevalencia de marcadores anti-T. cruzi, comparar la sensibilidad y especificidad relativas de las dos técnicas de tamizaje que utilizamos en nuestra División y confirmar los resultados con un tercer ensayo. Se estudiaron un total de 20 860 donantes voluntarios por hemoaglutinación indirecta (HAI) y enzimoinmunoensayo (EIE). Las muestras repetidamente reactivas fueron ensayadas por un EIE llevado a cabo en tiras de nitrocelulosa (DB). Los sueros que resultaron reactivos en al menos dos de las pruebas se consideraron positivos. La prevalencia de marcadores anti-T. cruzi, fue de 2.76 por ciento (576 muestras). De todas las muestras estudiadas, el 1.87 por ciento fueron confirmadas positivas. No se registraron flasos negativos para la prueba de EIE, mientras que 98 muestras (0.47 por ciento) fueron falsos negativos para el HAI. La especificidad relativa fue del 99.3 por ciento y 99.8 por ciento para EIE y HAI respectivamente. En nuestro caso, el descarte de unidades falsamente reactivas corresponde a casi el 0.9 por ciento del total de donaciones, de las cuales dos tercios corresponden a falsos EIE y un tercio a falsos HAI. Es importante destacar que en la población estudiada no se han resgistrado falsos negativos para EIE pero sí para HAI, lo que indicaría, que a pesar de que el primer método es menos específico, resulta mucho más sensible. Resulta de importancia la confirmación de los resultados obtenidos en las pruebas tamiz para evitar al aviso innecesario a los donantes falsamente reactivos y permitir eventualmente futuras donaciones. El DB empleado en el presente estudio resulta una alternativa útil para este propósito.

Evaluación de una técnica de enzimoinmunoensayo para detección de anticuerpos anti-HTLV-I / Anti HTLV-EIA screening test assessment

El HTLV-I y el HTLV-II son virus cuya transmisión ocurre de madre a hijo, por contacto sexual y por transfusiones de sangre o por compartir agujas contaminadas. El HTLV-I está asociado al menos con dos enfermedades, la leucemia-linfoma T del adulto y la parapesia espástica tropical. Con el fin de prevenir la transmisión por vía transfusional en varios países se testean las donaciones de sangre para Ac anti-HTLV-I. El presente estudio tuvo como objetivo la evaluación de un nuevo test de enzimoinmunoensayo para detección de Ac anti HTLV-I (Abbott HTLV-I 2.0 EIA, USA) utilizando muestras repetidamente reactivas por la prueba de AP y positivas, indeterminadas o negativas por WB. Se utilizaron 63 sueros obtenidos de donantes voluntarios vinculares de sangre. Treinta fueron negativos por WB, 13 reactivos para HTLV-I, 2 reactivos para HTLV-II, uno para HTLV-I/II y 17 indeterminados. Todas las muestras positivas por WB también lo fueron por EIE; en cuanto a las negativas por la técnica confirmatoria, el 13 por ciento fue reactivo por EIE. Por último, de los sueros indeterminados, el 53 por ciento fue positivo por EIE. La técnica del EIE resultó tener muy buena sensibilidad y podría constituir una alternativa útil en el caso de no disponer momentáneamente de reactivos para realizar la confirmación. Según lo observado en nuestra experiencia, un resultado positivo por EIE para una muestra repetidamente reactiva por AP indica con alta probabilidad que están presentes Ac anti-HTLV y viceversa.

Evaluation of HTLV-I/II infection in blood donors in Buenos Aires

HTLV-I and HTLV-II are two related retroviruses that are transmitted by sexual contact, breast feeding, blood transfusion and needle sharing. In this study the prevalence of HTLV-I and HTLV-II was evaluated in voluntary blood donors as a measure of the infection in the general population. Samples were tested by a gelatine particle agglutination test and repeatedly reactive samples were confirmed by Western blot tests (WBT), enriched with recombinant rgp21, rgp46I y rgp46II proteins, which differentiates HTLV-I and HTLV-II antibodies. Of 19,426 samples, 40 were repeatedly reactive by particle agglutination (0.21 percent). When analyzed by WBT, 6 met the criteria for HTLV-I (0.036 percent), 2 for HTLV-II (0.01 percent) and 1 for HTLV-I/II, 13 samples were indeterminate and 18 were negative. The prevalence is low and comparable to that from non endemic countries. Screening for anti HTLV-I/II antibodies is necessary to prevent transmission through blood transfusions.

Neural spread of Junin virus in intraperitoneally inoculated rats

Una vez establecida la ruta neural como la seguida por el virus Junín (VJ) a partir de su inoculación intradérmica en ratas lactantes, resultaba de interes determinar cuál era la vía adoptada luego de inoculado intraperitonealmente. Desde la 2da semana se evidenció una enfermedad neurológica que a los 30 días post-infección alcanzó un 84 por ciento de mortalidad. En curso de ese período, se efectuaron cosechas de tejidos extraneurales y neurales para la marcación por inmunoperoxidasa del antígenos viral y el examen histopatológico, asi como la titulación de infectividad que también se extendió a sangre. En todas las muestras de tejido en que se detectó virus infectivo, sea por cocultivo o por aislamiento convencional, se logró la marcación del antígeno viral. El VJ estuvo presente en valores mínimos en bazo e hígado desde el día 2 al 5, y en sangre del 5 al 15. En tejidos neurales, el antígeno viral fue inicialmente revelado al día 5, tanto en ganglios raquídeos torácicos como en los segmentos medulares relacionados. A partir del día 7, la positividad se extendió a la médula espinal en toda su extensión; a la vez, ya había evidencias de presencia viral en tronco cerebral, con disfusión al resto de estructuras encefálicas desde el día 10. Pese a la presencia masiva del antígeno viral en neuromas, dichas células no mostraban cambios morfológicos aparentes. Dado que la infección de ganglios raquídeos y de médula espinal invariablemente precedió al acesso viral a encéfalo, y ello ocurrió en forma concomitante a la desaparición del virus en órganos linfo-reticulares y en sangre, la vía neural parece ser la adoptada por el VJ desde cavidad peritoneal hasta sistema nervioso central

Inmonopatología inducida en la rata por virus Junín / Immunopathology induced in the rat by Junin virus

La infección de la rata de 10 días de vida por vía intracerebral con la cepa XJ del virus Junín, da lugar a un cuadro encefalítico con un 100% de mortalidad. Los presentes experimentos con suero antitimocito (SAT) demuestran la participación de la respuesta celular en la patología de este grupo etario. En cuanto al tratmiento con SAT, se utilizaron tres esquemas, siendo el más efectivo el que consistió en dosis desde el día -1 hasta el día +9, y en los días +12, +14 y +16, siendo el día 0 el de la inoculación de virus. Se alcanzó un 54% de sobrevida y un retraso en el día promedio de muerte de 12 días. No hubo diferencias en el título en cerebro de los animales tratados y los controles infectados. Las ratas de 2 días de vida al recibir el virus presentan persistencia. Cuando a estos animales se les transfirieron esplenocitos de ratas infectadas a los 10 días de edad se produjo una mortalidad de 40% en los receptores. Por lo tanto puede concluirse que: a) la encefalitis en el animal de 10 días de vida es de origen inmunológico y b) la rata de 10 días presenta una población linfocitaria que al ser transferida al animal persistente, provoca enfermedad y muerte